国产999精品久久久久久麻豆_zzz444成人天堂7777_日韩中文字幕一区二区_啵啵影院午夜男人免费视频_国产精品久久久久久久久久新婚_www.色.com

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章>讓您了解感受態(tài)細胞的制作方法?。?!
讓您了解感受態(tài)細胞的制作方法!??!
更新時間:2019-07-12   點擊次數(shù):1459次

感受態(tài)細胞主要原理就是通過處理使細胞的通透性變大,直觀的說,使得細胞膜表面出現(xiàn)一些孔洞,便于外源基因或載體進入感受態(tài)細胞。由于細胞膜的流動性,這種孔洞會被細胞自身所修復(fù)。

感受態(tài)細胞制作方法:

CaCl2法

1. 將快速生長的大腸桿菌置于經(jīng)低溫(0℃)預(yù)處理的低滲氯化鈣溶液中,便會造成細胞膨脹,同時Ca2+會使細胞膜磷脂雙分子層形成液晶結(jié)構(gòu),促使細胞外膜與內(nèi)膜間隙中的部分核酸酶解離開來,離開所在區(qū)域,誘導(dǎo)細胞成為感受態(tài)細胞

細胞膜通透性發(fā)生變化,極易與外源DNA相粘附并在細胞表面形成抗脫氧核糖核酸酶的羥基-磷酸鈣復(fù)合物。

聯(lián)合其它的二價金屬離子(如Mn、Co)、DMSO或還原劑等物質(zhì)處理細菌,則可使轉(zhuǎn)化率提高100~1000倍。

2. 此時,將該體系轉(zhuǎn)移到42℃下做短暫的熱刺激(90s),細胞膜的液晶結(jié)構(gòu)會發(fā)生劇烈擾動,并隨機出現(xiàn)許多間隙,外源DNA就可能被細胞吸收。進入細胞的外源DNA分子通過復(fù)制、表達,實現(xiàn)遺傳信息的轉(zhuǎn)移,使受體細胞出現(xiàn)新的遺傳性狀。

3. 將轉(zhuǎn)化后的細胞在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng),篩選出帶有外源DNA分子的陽性克隆。

電轉(zhuǎn)法

電擊法不需要預(yù)先誘導(dǎo)細菌的感受態(tài),依靠短暫的電擊,促使DNA進入細菌,轉(zhuǎn)化率zui高能達到109~1010轉(zhuǎn)化子/ug閉環(huán)DNA。因操作簡便,愈來愈為人們所接受

網(wǎng)站首頁 關(guān)于我們 新聞中心 產(chǎn)品中心 聯(lián)系我們
備案號:滬ICP備12045995號-12   GoogleSitemap   技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng) 管理登陸
© 2018 上海酶聯(lián)生物科技有限公司(www.awhuman.cn) 版權(quán)所有 總訪問量:848402
主站蜘蛛池模板: 一区二区影院 | 精品国产视频 | 亚洲精品免费在线观看 | 日韩亚洲欧美在线观看 | 五月婷婷色综合 | 青青草原国产 | 97精品视频在线观看 | 日韩欧美一区二区三区久久婷婷 | av片在线免费观看 | 国产精品天堂 | 成人在线国产 | 亚洲国产成人精品女人久久久 | 天天干天天爽 | 激情中文字幕 | 欧美色综合天天久久综合精品 | 亚洲自拍偷拍视频 | 91av在线免费观看 | 91综合在线 | 黄色一级视频网站 | 黄色片网站在线观看 | 韩国三级中文字幕hd久久精品 | 免费国产视频 | 国产精品天堂 | 91一级片| 永久黄网站色视频免费观看w | 欧美顶级黄色大片免费 | 一级片黄色 | 精品国产欧美一区二区三区成人 | 国产香蕉在线 | 黄色中文字幕 | 国产一级免费视频 | 激情久久久 | 福利视频一区二区 | 91蜜桃在线观看 | 精品在线一区 | 亚洲天堂一区二区三区 | av手机天堂网 | 欧美狠狠干| 日韩视频一区 | 日韩不卡在线观看 | 99视频免费 |